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脈沖強(qiáng)光對(duì)微生物的殺菌效果

發(fā)布時(shí)間:

2023/03/20

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脈沖強(qiáng)光是一項(xiàng)有望取代傳統(tǒng)的物理和化學(xué)殺菌手段的新技術(shù),它是利用瞬時(shí)的、高強(qiáng)度的脈沖光能量,有效殺滅暴露在食品和包裝材料表面或水中的細(xì)菌、霉菌、 孢子、病毒、原生質(zhì)、休眠孢子等各類(lèi)微生物以及食品中的內(nèi)源酶。脈沖強(qiáng)光對(duì)各類(lèi)微生物殺菌效果都非常明顯,而且它是一種無(wú)汞、低熱、無(wú)副產(chǎn)物的新型殺菌技術(shù)。

脈沖強(qiáng)光是一項(xiàng)有望取代傳統(tǒng)的物理和化學(xué)殺菌手段的新技術(shù),它是利用瞬時(shí)的、高強(qiáng)度的脈沖光能量,有效殺滅暴露在食品和包裝材料表面或水中的細(xì)菌、霉菌、 孢子、病毒、原生質(zhì)、休眠孢子等各類(lèi)微生物以及食品中的內(nèi)源酶。脈沖強(qiáng)光對(duì)各類(lèi)微生物殺菌效果都非常明顯,而且它是一種無(wú)汞、低熱、無(wú)副產(chǎn)物的新型殺菌技術(shù)。

一、脈沖強(qiáng)光殺菌機(jī)理

1.光化作用

由于細(xì)菌的細(xì)胞中含有細(xì)菌的遺傳信息核酸,當(dāng)核酸被脈沖強(qiáng)光照射時(shí)會(huì)大量吸收紫外光,從而在體內(nèi)形成一部分的間二氮雜苯和間二氮雜苯的異構(gòu)體。這種物質(zhì)會(huì)使細(xì)菌自身的新陳代謝機(jī)能出現(xiàn)障礙,并且會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌的遺傳性出現(xiàn)問(wèn)題,直至死亡。脈沖強(qiáng)光中的200-280nm部分容易被吸收,光化作用主要是UVC。

2.光熱作用

雖然光化作用主要來(lái)自于UVC,但脈沖強(qiáng)光的UVA和UVB部分也起著一定的殺菌作用。當(dāng)輻射劑量達(dá)到一定的水平,UVA和UVB可以使細(xì)胞的表面溫度迅速升高至130°C,從而破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁,使細(xì)胞液蒸發(fā),徹底破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),導(dǎo)致死亡

二、脈沖強(qiáng)光對(duì)大腸桿菌的殺菌實(shí)驗(yàn)

1.實(shí)驗(yàn)裝置以及參數(shù)

自制脈沖強(qiáng)光殺菌裝置,該裝置采用電容式脈沖發(fā)生電路,手動(dòng)控制,使用直管型脈沖強(qiáng)光燈做脈沖光源,用半圓柱形反光面對(duì)脈沖光源聚光。經(jīng)測(cè)試,裝置所發(fā)出脈沖強(qiáng)光波長(zhǎng)范圍為200~1100nm, 脈沖強(qiáng)光的脈沖寬度為20μs,輸入能量為644J。該裝置光照強(qiáng)度、閃照次數(shù)、閃照間隔、受照射物體離光源的距離均可調(diào)節(jié)控制。

2.實(shí)驗(yàn)方法

2.1菌液的制備 

將斜面試管中的大腸桿菌活化,在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中接種于無(wú)菌水中, 接種量控制在106 ~107個(gè)/ml。

2.2處理方法 

每個(gè)直徑為75 mm平皿盛入一定體積的待處理菌液,放在殺菌處理室中央,與光源地距離2 cm,按照設(shè)定的工藝參數(shù)進(jìn)行脈沖強(qiáng)光閃照處理,每次重復(fù)試驗(yàn)3次。

2.3試驗(yàn)參數(shù)設(shè)置 

光照強(qiáng)度: 0. 2, 0. 25, 0. 3, 0. 375,0. 5, 0. 625, 0. 75 J /cm2 ; 閃照次數(shù): 1, 2, 4, 8, 16;菌液厚度:3. 4, 6. 8, 10. 2, 13. 6, 17 cm;菌液透光率: 1, 2, 4, 8, 16, 32;菌液濃度(稀釋倍數(shù)) : 10, 100, 1 000倍。

2.4大腸桿菌致死檢驗(yàn) 

將處理完的菌液按1 ∶10 稀釋,選取10- 2 , 10- 3 , 10- 4 , 10 - 5 , 10 – 6,5個(gè)稀釋度,每個(gè)稀釋度做3次重復(fù)試驗(yàn),記數(shù)時(shí)取平均值。菌檢使用蛋白胨培養(yǎng)基。經(jīng)培養(yǎng)后與對(duì)照組(未經(jīng)處理的同樣菌種)進(jìn)行比較。

將處理過(guò)的菌用平板計(jì)數(shù)法進(jìn)行活菌數(shù)的檢測(cè)。

殺菌率= [ (對(duì)照殘菌數(shù)- 處理殘菌數(shù)) /對(duì)照殘菌數(shù)]×100%

選擇光照強(qiáng)度、閃照次數(shù)、菌液厚度、菌液透光率、菌液濃度作為影響因素。

3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 光照強(qiáng)度對(duì)殺菌效果的影響

光照強(qiáng)度與殺菌率成正比,殺菌率隨光照強(qiáng)度增加而增加,當(dāng)光照強(qiáng)度為0.75J/cm2 時(shí)大腸桿菌完全至死。

3.2 閃照次數(shù)對(duì)殺菌效果的影響

在光照強(qiáng)度為0.5J/cm2,菌液厚度3.4 mm,菌液透光率為100的情況下,采用不同的閃照次數(shù)進(jìn)行處理。閃照次數(shù)與殺菌率成正比,殺菌率隨閃照次數(shù)增加而增加。                

3.3 菌液厚度對(duì)殺菌效果的影響

在透光率為1的情況下,菌液厚度與殺菌率成反比,菌液液層越厚,殺菌越低。當(dāng)透光率為100時(shí),改變菌液厚度,殺菌率基本沒(méi)有變化。由此得出,菌液厚度與菌液透光率相互影響,一定菌液厚度只有在一定透光率下才影響殺菌效果,反之,也成立.        

從以上結(jié)果分析可看出,脈沖強(qiáng)光殺菌對(duì)于大腸桿菌的殺菌效果是十分顯著的,在幾個(gè)脈沖就可達(dá)到完全致死,與傳統(tǒng)紫外線殺菌相比,在相同的殺菌效果下,殺菌處理時(shí)間更快,該技術(shù)是一種具有廣闊前景的殺菌技術(shù),對(duì)其他微生物殺菌效果如下表:

 

菌   種

處 理 方 式

殺 滅 效 果

來(lái)   源

大腸桿菌

輻照強(qiáng)度0.5J/cm2

閃照16次

6個(gè)數(shù)量級(jí)

東北林業(yè)大學(xué)林學(xué)院

沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院

枯草芽孢桿菌

輸入能量700J

閃照30次

5個(gè)數(shù)量級(jí)

華南理工大學(xué)食品生物工程學(xué)院

單核細(xì)胞增生李斯特菌

單次輸入3J

閃照200次

4個(gè)數(shù)量級(jí)

蘇格蘭斯特拉斯克萊德大學(xué)生物科學(xué)和生物技術(shù)學(xué)院

沙門(mén)氏菌

單次輸入3J

閃照200次

4個(gè)數(shù)量級(jí)

蘇格蘭斯特拉斯克萊德大學(xué)生物科學(xué)和生物技術(shù)學(xué)院

金黃色球菌

輻照強(qiáng)度5.6J/cm2

閃照5S

8個(gè)數(shù)量級(jí)

美國(guó)賓夕法尼亞州立大學(xué)農(nóng)業(yè)和生物工程學(xué)院

釀酒酵母菌

輸入能量700J

閃照30次

7個(gè)數(shù)量級(jí)

華南理工大學(xué)生物工程學(xué)院

啤酒酵母菌

單次輸入7J

閃照50次

6-8個(gè)數(shù)量級(jí)

比利時(shí)根特大學(xué)食品微生物學(xué)和食品化學(xué)實(shí)驗(yàn)室

黑曲霉菌

輸入能量700J

閃照40次

4個(gè)數(shù)量級(jí)

華南理工大學(xué)生物工程學(xué)院

皰疹病毒HSV-1

1.0 J/cm2的總劑量

5個(gè)數(shù)量級(jí)

英國(guó)赫特福特郡生物食品研究所

牛疹病毒

2.0 J/cm2的總劑量

4-8個(gè)數(shù)量級(jí)

英國(guó)赫特福特郡生物食品研究所

甲型肝炎病毒

2.0 J/cm2的總劑量

5個(gè)數(shù)量級(jí)

英國(guó)赫特福特郡生物食品研究所

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